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[ . . . INDICE TEMATICO . . . ]
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Autor :
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ALMARAZ ALMARAZ, Lidia |
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Titulo :
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Protocolos de molienda de hojas para la extracción de ADN en Cedrela odorata L.&Swietenia microphylla King. |
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I. INTRODUCTION............................................................1
1.1. OBJETIVOS............................................................3
1.1.l Objetivo general...................................................3
1.1.2 Objetivo especificos...............................................3
II. REVISIONBffiUOGRAFICA..................................................4
2.1. Caractcristicas Gcnerales de (Cedrela odorata L.)....................4
2.1.1. Distribucion geográfica...........................................4
2.1.2. Considcraciones gcnerales.........................................4
2.1.3. Importancia económica.............................................5
2.1.4. Caractcristicas Botanicas (Cedrela odorata L.)....................5
2.1.4.1. Información taxonómica.........................................5
2.1.4.2. Descripción de la Especie......................................6
2.1.4.3. Floración y reproducción.......................................7
2.1.4.4. Plagas y enfermedades..........................................7
2.2. Características generales (Swietenia macrophylla king)...............8
2.2.1. Distribución geográfica...........................................8
2.2.2. Consideraciones generales.........................................9
2.2.3. Importancia económica.............................................9
2.2.4. Caracterización botánica..........................................10
2.2.4.1. Clasificación taxonómica.......................................10
2.2.4.2. Caracterización botánica de la especie.........................10
2.2.4.3. Ecologia.......................................................11
2.2.4.4. Floración y reproducción.......................................12
2.3. Estudios genéticos en el sector forestal.............................12
2.3.1. Variación genética................................................12
2.3.2. Estrategia de recolección.........................................13
2.3.3. Muestreo y manejo de las muestras.................................13
2.3.4. Muestreo..........................................................14
2.3.5. Cadena de custodia................................................14
2.4. Silica gel...........................................................15
2.4.1. Ventajas..........................................................15
2.4.2. Desventajas.......................................................16
2.5. Nitrogeno liquido....................................................17
2.5.1. Identillcacion....................................................17
2.5.2. Ventajas..........................................................18
2.5.3. Desventajas.......................................................19
2.6 Dificultades en la extracción de ADN..................................19
2.7 Compuestos fenólicos..................................................20
2.8 Extracción de ADN.....................................................21
2.8.1. Método de extracción y purificación con CTAB......................22
2.8.1.1. Principios del método del CTAB: lisis. extracción
y precipitación................................................23
2.8.1.2. Lisis de la membrana celular...................................23
2.9 Cuantificación de ADN.................................................24
2.10 Determinación mediante electroforesis en geles de agarosa............24
2.10.1 Electroforesis....................................................25
2.11 Amplificación........................................................25
2.12 Diversidad Genética de la planta.....................................26
2.12.1. Herramientas para evaluar la diversidad genética.................27
2.12.2. Marcadores.......................................................28
2.12.2.1. Marcadores moleculares........................................29
III. MATERIALES Y METODOS..................................................30
3.1. Ubicación............................................................30
3.2. Materiales...........................................................31
3.2.1. Material biológico................................................31
3.2.2. Recolección y almacenamiento de muestras..........................31
3.3. Material de laboratorio..............................................33
3.4. Metodología..........................................................35
3.4.1. Molienda de muestras..............................................35
3.4.2. Procedimientos para extracción de ADN.............................37
3.4.2.1 Preparación de soluciones.......................................37
3.4.2.2 Extracción de ADN...............................................37
3.4.2.3 Electroforesis en gel de agarosa y Cuantificación de
ADN por tinción con Bromuro de etidio...........................39
IV. RESULTADOS Y DISCUSION.................................................41
4.1. Molienda.............................................................41
4.2. Extracción de ADN....................................................44
4.3. Electroforesis en gel de agarosa.....................................45
4.4. Visualización de las bandas..........................................46
V. CONCLUSION..............................................................48
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